Co to jest western blotting?

Co to jest western blotting?
Anonim

Odpowiedź:

Wykorzystanie przeciwciał do wykrywania białek zostało rozdzielone przez SDS-PAGE, a następnie przeniesione na błonę.

Wyjaśnienie:

Komórki zawierają mieszaninę białek (wiele tysięcy) i można je rozdzielić za pomocą SDS-PAGE.

Białka z SDS-PAGE są następnie przenoszone, za pomocą pola elektrycznego, z żelu do membrany zwykle wytwarzanej nitrocelulozy lub fluorku poliwinylidenu (PVDF).

Membrana jest sondowana pierwszorzędowym przeciwciałem specyficznym dla białka będącego przedmiotem zainteresowania. Wtórne przeciwciało jest następnie stosowane do wykrywania pierwszorzędowego przeciwciała. Przeciwciało drugorzędowe będzie zawierało marker, który może być wykryty przez reakcję chemiczną w celu uzyskania widocznego pasma na membranie lub sygnału, który może być przechwycony przez wyspecjalizowaną kamerę.

W razie potrzeby mogę rozwinąć tę odpowiedź z wielką głębią, ponieważ podczas mojej kariery wykonałem kilkaset zachodnich plam.