Odpowiedź:
GAPDH jest często używany jako kontrola ładowania.
Wyjaśnienie:
W Western blot często używamy GAPDH jako kontroli ładowania. Oznacza to, że sondując GAPDH możemy sprawdzić, czy mamy obciążone równoważne ilości białek na różnych pasmach blotu.
Przykład użycia - powiedzmy, że mamy chorobę, która naszym zdaniem powoduje podniesienie poziomu określonego białka w komórce. Przygotowalibyśmy próbkę ze „zdrowych” komórek i innej próbki z „chorych” komórek. Następnie załadowalibyśmy równoważne ilości białek obu próbek na żel do Western blot.
Po sondowaniu blotu dla naszego interesującego nas białka stwierdzamy, że w komórkach chorych poziom białka jest rzeczywiście podwyższony (czyli ciemniejszy prążek jest wytwarzany na plamie). Aby udowodnić, że ten wzrost białka jest spowodowany zmianą ekspresji w komórce, zamiast artefaktu ładowania (to znaczy, bardziej dynamiczne pasmo jest spowodowane zmianą ekspresji białka w komórkach, a nie przez przypadkowe ładowanie więcej z próbki „choroby” niż „zdrowej”) sondujemy również plamę GAPDH, aby pokazać, że całkowite poziomy białka są takie same w obu pasach.
W ten sposób pokazujemy, że równoważne białko zostało załadowane w dwóch pasach i że obserwowana zmiana intensywności pasma wynika ze zmian w ekspresji białka dla interesującego białka.
Co to jest klucz taksonomiczny i jak jest używany? + Przykład
To alternatywni naukowcy używają do identyfikacji zwierząt. Zasadniczo według ich cech. Na przykład, jeśli widzisz czarne plamy na zwierzęciu. powie: Idź do 4 lub brak plamek Idź do 3. Po prostu pomyśl o tym jak o labiryncie, podążaj właściwą ścieżką, odnajdziesz tożsamość zwierzęcia.
Dlaczego niektóre pojedyncze rzeczowniki właściwe wymagają „tego”, podczas gdy inne nie? Na przykład, słusznie jest powiedzieć „Stonehenge”, ale słuszne jest również powiedzenie „Wielki Mur Chiński”?
Zobacz wyjaśnienie. Jeśli nazwa miejsca zawiera, stosujemy przed nim artykuł określony. Przykłady: Bank Anglii, budynki Parlamentu, Wielki Mur Chiński Źródło: Raymond Murphy, Gramatyka angielska w użyciu, str. 154
Dlaczego Western blot potwierdza elisę? + Przykład
Zazwyczaj jest to test swoistości przeciwciała. W teście ELISA bardzo trudno jest stwierdzić, czy przeciwciało wiąże się z białkiem będącym przedmiotem zainteresowania, całkowicie innym białkiem lub szeregiem białek. Western blot zostanie użyty do sprawdzenia swoistości przeciwciała (należy zauważyć, że Western blot może nie wykryć wszystkich reakcji krzyżowych z nieprawidłowymi białkami). W analizie Western blot można zobaczyć rozmiar białka, z którym wiąże się przeciwciało (nie można tego zrobić w teście ELISA). Dlatego, na przykład, jeśli twoje przeciwciało powinno wiązać się z białkiem o masie 56 kDa i widzisz prą