Jak naukowcy izolują DNA w celu jego zbadania?

Odpowiedź:

Jest kilka kroków, aby to zrobić, proszę zignoruj mój zły angielski, mam nadzieję, że nadal rozumiesz ten proces.

Wyjaśnienie:

To nie jest tak trudne, jak mogłoby się wydawać.

Powiedzmy, że chcemy wyizolować DNA z grasicy cielęcej, musisz postępować zgodnie z tymi instrukcjami (o ile wiem, są takie same dla jabłka, ale są małe wariacje):

1. Weź 3 sztuki 3 gramów i pokrój je w drobne kawałki, tak małe, jak to możliwe.

2. Umieść go w mikserze, z 75 ml cytrynianu sodu i soli sodowej (SSC) na sztukę i upewnij się, że ostrze miksera jest całkowicie pokryte SSC, więc jeśli chcesz, dodaj kawałek grasicy.

   SSC zapewnia, że błony komórkowe są rozpuszczane.

   Mieszaj, aż wszystko będzie gładkie.

3. Umieść go w probówce do wirówki i wytaruj ją inną rurką, aby wirówka nie pękła

4. Umieścić probówkę w wirówce na 20 minut przy 5000 obr./min

5. Gdy wyciągniesz rurki z wirówki, powinieneś zobaczyć dwa elementy. Dno ma substancję stałą, nazywamy ją peletką, która utrzymuje jądra komórkowe w DNA. Zobaczysz również płynną substancję, która nazywana jest supernatantem i składa się z SSC z rozpuszczonymi błonami komórkowymi.

6. Wylać supernatant jednym ruchem płynu, to się nazywa dekantacja, a to pozostawia cię z granulką.

7. Umieścić niewielką ilość 2,2 M NaCl w probówce z peletką, tak aby pelet był pokryty tylko NaCl. NaCl powoduje, że białka otaczające DNA wytrącają się.

8. Wymieszaj go pustą probówką lub mieszadłem. W końcu powinieneś otrzymać dwa składniki. Białka na dnie i lepki płyn.

9. Wyjmij lepką ciecz pipetą i upewnij się, że nie bierzesz żadnych białek z lepkim płynem. (bardzo małe kawałki białka są bardzo trudne do uniknięcia, ale staraj się unikać jak największej liczby białek)

10. Umieść lepki płyn, który pipetowałeś, w zlewce i dodaj do niego 2x tyle etanolu. Ale delikatnie dodawaj etanol, ponieważ nie chcesz mieszać go z DNA. Na granicy między etanolem a lepkim płynem powinny pojawić się pęcherzyki DNA.

11. Delikatnie wymieszaj szklanym prętem, DNA jest naładowane ujemnie, więc powinno przykleić się do pręta.

12. Umieść go w probówce i rozpuść za pomocą SSC.

Specjalna maszyna może ci powiedzieć, ile DNA wyizolowałeś i jak czyste jest.